液相色譜不受分析對(duì)象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%,而80%則需用液相色譜來(lái)分析。液相色譜已經(jīng)廣泛應(yīng)用于藥物的含量測(cè)定、組成分析、質(zhì)量控制等方面。近年來(lái) 液相色譜在藥物分析的應(yīng)用 中占主要地位。

液相色譜在天然藥物及復(fù)方成藥分析中的應(yīng)用

ELSD能夠測(cè)定沒有紫外吸收或?yàn)樽贤饽┒巳跷盏臉悠罚烊划a(chǎn)物中的許多成分無(wú)疑找到了直接、準(zhǔn)確的測(cè)定方法。ELSD在天然產(chǎn)物及其復(fù)方成藥分析中的應(yīng)用報(bào)道主要有皂苷類、生物堿類、萜類內(nèi)酯等。皂苷無(wú)紫外吸收或僅為末端吸收，ELSD能夠?qū)ζ洳唤?jīng)衍生進(jìn)行檢測(cè)，在HPLC—ELSD的應(yīng)用中這方面的報(bào)道多。主要有一次性分離分析天然人參、生脈散復(fù)方、育精膠囊中的多種人參皂苷；西洋參中的人參皂苷和擬人參皂苷定量測(cè)定；三七中的三七皂苷的含量分析；黃芪、黃芪注射液和保元湯中的黃芪皂苷、黃芪甲甙的分離和測(cè)定；麥冬中的甾體皂甙元；天麻中的天麻甙的含量測(cè)定等。這些研究主要采用Cl8柱、乙晴與水作流動(dòng)相，不經(jīng)衍生直接測(cè)定多組分含量，結(jié)果顯示方法靈敏度高（一般檢測(cè)限低于3μg／m1）、線性關(guān)系良好。對(duì)于無(wú)紫外吸收的生物堿類成分，ELSD同樣顯示出操作簡(jiǎn)單、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。對(duì)比HPLC—UV法測(cè)定貝母中的甾類貝母生物堿，采用ELSD檢測(cè)器，不但不需衍生化操作，提高了結(jié)果的準(zhǔn)確度，而且可檢測(cè)出不含雙鍵的貝母甲素，對(duì)動(dòng)物體內(nèi)的生物堿類成分如河豚du素，無(wú)紫外吸收且安全性低，不適合衍生化法，可用ELSD法進(jìn)行檢測(cè)，獲得滿意結(jié)果。銀杏作為一種保健藥品，其主要活性成分為黃酮類和萜類內(nèi)酯，以往銀杏中的萜類內(nèi)酯成分主要采用HPLC—UV法和HPLC—RI測(cè)定，但由于萜類內(nèi)酯紫外吸收差，又含少量物質(zhì)的干擾，結(jié)果穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性較差。隨著ELSD的發(fā)展和普及，這些方法已經(jīng)逐漸被ELSD法所取代。

液相色譜在抗生素分析中的應(yīng)用

生產(chǎn)抗生素時(shí)，首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如：青霉素、四環(huán)素、頭孢子菌素、紅霉素、柔紅霉素、慶大霉素等的發(fā)酵產(chǎn)物，均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動(dòng)相或用離子對(duì)法，分析主體及其收產(chǎn)物的含量。對(duì)普魯卡因酰胺、茶堿等可進(jìn)行主體含量的測(cè)定，對(duì)硝*甘油可測(cè)定主體含量及其降解產(chǎn)物，以便保證藥物的熱量。

液相色譜作為常規(guī)分析方法在藥物分析中的應(yīng)用

液相色譜法作為藥物分析中的主要的分析方法，常被作為常規(guī)分析和檢驗(yàn)方法。近年來(lái)在這個(gè)方面的研究比較多，劉樹業(yè)等為時(shí)刻監(jiān)控治療肝癌時(shí)的抗癌藥物劑量即血中的藥物濃度，提高療效，減少副作用，采用紫外-HPLC法對(duì)血中和組織中的阿霉素濃度進(jìn)行分析。用UV-240紫外分光光度計(jì)，BECKMAN332型液相色譜儀，采用反向色譜法。針對(duì)近幾年國(guó)際奧委會(huì)醫(yī)學(xué)委員會(huì)公布的禁用表中新增藥物及一系列利尿劑的相關(guān)化合物進(jìn)行了研究，比較了不同的提取方法及回收率，研究了幾種藥物的排泄情況；建立了同時(shí)分析13種利尿劑的液相色譜測(cè)定方法，檢出限小于5ng。用0.02mol/L的三羥甲基胺基甲烷（用磷酸調(diào)pH值至7）和甲醇（含2%乙酸和0.25%庚烷磺酸鈉）作流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，建立了脂性油膏藥物中黃芩甙含量的反相液相色譜分析方法，本法分析速度快，重現(xiàn)性好，黃芩甙的平均回收率為103.7%。

液相色譜在藥物殘留測(cè)定上的應(yīng)用

由于液相色譜能夠?qū)繌?fù)雜組分進(jìn)行定量分析，被廣泛使用于藥物殘留的測(cè)定上。以液相色譜法建立了豬、羊、雞肝組織中西*因殘留量的檢測(cè)方法。采用ODS色譜柱，二極管陣列檢測(cè)器，甲醇/水（65/35）為流動(dòng)相，222nm檢測(cè)波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)。西*因?qū)φ掌啡芤旱牡蜋z測(cè)限為0.1mg/L,線性范圍為0.1～20mg/L,標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：y=-22459.83+454684.31x,線性關(guān)系良好（r=0.9999）。樣品以乙腈提取，并加入無(wú)水硫酸鈉和正已烷，過(guò)濾后去除雜質(zhì)，乙腈層在45～50℃下水浴氮?dú)獯蹈桑瑲堅(jiān)眉状既芙夂螅M(jìn)樣分析。平均回收率均大于80%,日間和日內(nèi)變異系數(shù)均小于10%。符合藥物殘留痕量分析要求。研究了動(dòng)物源性食品中甲氧芐胺嘧啶藥物殘留的提取、凈化和液相色譜分析條件，建立了液相色譜法測(cè)定動(dòng)物性食品中甲氧芐胺嘧啶藥物殘留的方法，該法檢測(cè)限0.025mg/kg,回收率為84%～98%。此外，在人血中藥物含量的測(cè)定中也有很多的應(yīng)用。建立了血漿及尿液中異*肼的液相色譜快速測(cè)定方法，以滿足臨床藥物分析和法醫(yī)學(xué)鑒定的需要，提高對(duì)血漿及尿液中異*肼濃度檢測(cè)的準(zhǔn)確性。以香草醛為衍生化試劑，將異*肼經(jīng)柱前衍生為異*肼香草醛腙，直接對(duì)處理后樣品中的腙進(jìn)行定性、定量分析。以在空白人體液樣本中定量添加標(biāo)準(zhǔn)異*肼的方法考察了樣品的前處理方法、儀器條件、線性范圍、精密度、回收率等，并對(duì)健康受試者血液中的異*肼濃度進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。

液相色譜法由于分析速度快、分離效率高、檢測(cè)靈敏度高、檢測(cè)自動(dòng)化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理較簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)在確定藥方案和治療劑量，以及藥物動(dòng)力學(xué)分析和藥效學(xué)評(píng)價(jià)提供了方法的基礎(chǔ)，有著廣泛的應(yīng)用前景。